技術(shù)文章
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RNA提取試劑盒用于從細(xì)胞、組織、新鮮血液和病毒中提取200bp及以下的smallRNA,用LB10裂解樣品后,加入氯仿,溶液分為無色水相和粉紅色有機相,RNA在水相中;用RNA硅膠膜離心柱特異地吸附水相中的大分子量RNA(28SrRNA,18SrRNA,mRNA),流出液中的smallRNA用miRNA硅膠膜離心柱特異地吸附。與其它miRNA提取方法相比,該試劑盒裂解能力強、提取量高、專一性強,應(yīng)用范圍廣。RNA提取試劑盒的提取步驟:1、將處理后的樣品在室溫靜置5~10分鐘...
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CST抗體的制備工藝:根據(jù)CST抗體制備的原理和方法,主要分為單克隆抗體、多克隆抗體和基因工程抗體三大類。早期傳統(tǒng)的抗體制備方法是將抗原經(jīng)各種途徑免疫動物,由于抗原物質(zhì)具有多種抗原決定簇,故可刺激產(chǎn)生多種抗各種決定簇的抗體,形成細(xì)胞克隆,合成和分泌抗體到血清或體液中,故在其血清中實際上是含多種抗體的混合物,這種用體內(nèi)免疫法所獲得的免疫血清為多克隆抗體(polclonalantibody,Pab),也是第一代抗體。由于這種抗體是不均一的,無論是對抗體分子結(jié)構(gòu)與功能的研究或是臨床...
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細(xì)胞轉(zhuǎn)染是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉(zhuǎn)染目前已成為實驗室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因?qū)爰?xì)胞的范例;化學(xué)介導(dǎo)方法很多,如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法、和多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù);生物介導(dǎo)方法,有較為原始的轉(zhuǎn)染,和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。細(xì)胞轉(zhuǎn)染的幾種方法:1.脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法陽離子脂質(zhì)體表面帶正電荷,能與核酸的磷酸根通過...
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美國avivasystemsbiology抗體是指機體由于抗原的刺激而產(chǎn)生的具有保護作用的蛋白質(zhì)。它(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面。抗體能識別特定外來物的一個*特征,該外來目標(biāo)被稱為抗原。我們知道,一般免疫血清中含有特異性抗體和非特異性抗體,血清蛋白以及其他各種雜蛋白等,在制備特異性抗體過程中當(dāng)抗體的效價達(dá)到實驗預(yù)期之后,...
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PCR管/板有多種顏色,如透明色、白色、黃色、藍(lán)色、紅色……普通的PCR過程中,管/板的顏色并不會影響PCR的結(jié)果,但是在qPCR中,管/板的顏色對于結(jié)果是有很大的影響的。應(yīng)用于qPCR的耗材,一般是白色或者磨砂的塑料耗材。qPCR在DNA擴增反應(yīng)中,以熒光化學(xué)物質(zhì)測每次PCR循環(huán)后產(chǎn)物總量,因此與透明塑料管/板相比,白色或磨砂的管/板在應(yīng)對熒光時表現(xiàn)更為靈敏,并且結(jié)果更加準(zhǔn)確。這是因為白色的耗材可以阻止熒光折射出管,達(dá)到熒光折射的最小化,將更多的熒光信號反射回檢測器,從而增...
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